@MASTERSTHESIS{ 2018:1145193959, title = {Produção, purificação e caracterização de β-galactosidase a partir de Enterococcus faecium utilizando liquido metabólico de microalgas em meio de cultura comercial}, year = {2018}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/9643", abstract = "A β-galactosidase comumente conhecida como lactase, se destaca como uma das enzimas mais importantes utilizadas no processamento de alimentos. Convencionalmente, sua principal aplicação tem sido a hidrólise de lactose em produtos lácteos. Uma de suas principais fontes são bactérias ácido láticas, tais como Enterococcus faecium, conhecida pela capacidade de crescer em diferentes tipos de meios de cultura. No entanto, a produção em larga escala desse produto gera altos custos de meio de cultivo, levando a busca de alternativas para a substituição total ou parcial dele. O sobrenadante de microrganismos fotossintetizantes pode ser uma opção devido a quantidade de vitaminas, açúcares e proteinas presentes no meio que podem ser reaproveitados para o crescimento do microrganismo e produção de bioativos. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção, purificação e caracterização da β-galactosidase a partir de E. faecium usando sobrenadante de cultivo de microalgas em meio de cultura comercial. Inicialmente, foi realizado uma seleção do melhor meio alternativo utilizando sobrenadante de três microalgas (Chlorella vulgaris, Dunaliella tertiolecta e Scenedesmus sp) em diferentes concentrações combinado ao meio comercial, em seguida o melhor meio foi submetido ao planejamento experimental com análise de superfície de resposta com o intuito de otimizar as condições da produção da enzima, através das seguintes variáveis: pH, temperatura, tempo de cultivo e concentração de lactose. Os resultados mostraram que o meio contendo sobrenadante de C. vulgaris foi o melhor na produção da enzima e as variáveis pH, temperatura e concentração de lactose influenciaram significativamente na produção de β-galactosidade. Sendo a maior atividade encontrada 30,83 U/ml pelas variáveis: pH 8, 5% de lactose e temperatura de 31°C. A β-galactosidase foi purificada utilizando cromatografia de troca iônica e sua massa molecular foi determinada por eletroforese SDS-PAGE. O fator de purificação da enzima encontrado foi de 3,05 com rendimento de 7,02%. A enzima purificada foi então, caracterizada visando sua aplicação industrial sendo sua atividade máxima a 40°C e pH 7,0. Quando testada em estabilidade, a enzima manteve-se estável por 45 min a 30°C em pH ótimo. Estes resultados apontam que a β-galactosidade de E. faecium mostrou potencial aplicação industrial a partir da produção por resíduo de baixo custo.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biociência Animal}, note = {Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal} }