@PHDTHESIS{ 2018:1088515227, title = {Somatic embryogenesis receptor-like kinase (SERK) : aplicabilidade como marcador embriogênico em algodoeiro}, year = {2018}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/7468", abstract = "O lançamento de cultivares transgênicas de espécies recalcitrantes como o algodoeiro pode ser retardado devido à dificuldade em regenerar o tecido transformado. Os protocolos de regeneração existentes limitam-se a poucas variedades responsivas, como a Coker, normalmente utilizadas como receptoras durante a transformação genética. Um dos fatores que podem estar ligados à recalcitrância, é a ineficiência na ativação de diferentes genes durante o cultivo in vitro que podem estar associados à aquisição de competência embriogênica. Dentre os genes citados na literatura, destaca-se o Somatic Embryogenesis Receptor-Like Kinase (SERK) retratado como responsável pela transição do estado celular somático para embriogênico em diferentes espécies de plantas. A potencialidade deste gene como marcador de embriogênese somática tem sido investigada. Neste trabalho, foram analisadas a relação dos níveis de expressão de GhSERK1 com a aquisição de competência embriogênica em genótipos de algodoeiro. Para isto, uma sequência curta (186 pb) deste gene foi selecionada a partir de região conservada entre o algodão e cinco outras dicotiledôneas (Theobroma cacao, Citrus sinensis, Vitis vinifera, Glycine max e Phaseolus vulgaris) de modo a permitir que a sonda também possa ser aplicada na seleção de outras culturas. Inicialmente, os testes de expressão gênica via RT-qPCR foram realizados em seis genótipos com capacidade embriogênica conhecida (embriogênicos – Coker 312, BRS Rubi e BRS Seridó e não embriogênicos – BRS 201, CNPA Precoce 1 e BRS Topázio), a partir de RNA extraído de tecidos zigóticos meristemáticos. Os genótipos supracitados foram induzidos à embriogênese somática em meio suplementado com ácido naftalenoacético e kinetina. Corroborando com o resultado obtido via RT-qPCR, embriões somáticos formaram-se apenas na Coker 312, BRS Seridó e BRS Rubi. Nesta última, o percentual de plantas férteis obtidas foi maior (50%) do que o Coker 312 (41,6%). A aplicabilidade seletiva do GhSERK1 foi validada em quatro genótipos top lines (CNPA 286, CNPA BA 139, CNPA BA 1366 e CNPA BA 2247) com comportamento in vitro desconhecido. Simultaneamente, realizamos ensaios de indução à embriogênese somática para comprovar os resultados de expressão. Nos genótipos em que a expressão relativa foi maior (Coker 312 e CNPA BA 139) houve a formação de embriões somáticos. Uma sonda não radioativa foi então desenvolvida a partir do fragmento de 186 pb e atestada sua eficiência via Southern Blot nos genótipos top lines, manchas robustas foram observadas em Coker 312 e CNPA BA 139. Com base nestes resultados, este último foi selecionado como genótipo receptor em futuros estudos de transformação. Além disso, a sequência utilizada permitiu identificar os genótipos responsivos à embriogênese somática a partir de tecidos zigóticos, otimizando o tempo e os custos. Este trabalho fornece colaborações para a compreensão de fatores que podem estar envolvidos na aquisição de competência embriogênica gerando perspectivas de novos estudos para fortalecer os programas de melhoramento genético da cultura.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)}, note = {Rede Nordeste de Biotecnologia} }